✿ Restum ✿

Meu arquivo de protocolos de bancada: cada ficha leva ao passo a passo completo, com materiais, reagentes e dicas. Vou atualizando conforme padronizo novos métodos no laboratório ♥

• Passagem de Células Aderentes NOVO!

  Subcultivo de células aderentes em monocamada por tripsinização, com avaliação de confluência e semeadura de novo frasco.

  Cultivo Celular ⏱ ~40 min Cabine de segurança biológica
  Espiar a ficha

  Você vai precisar de

  PBS sem Ca²⁺/Mg²⁺ Tripsina-EDTA DMEM + 10% SFB Frascos estéreis Pipetas sorológicas Banho a 37 °C

  Em 5 etapas

  1. Checar a confluência ao microscópio.
  2. Aspirar o meio e lavar com PBS.
  3. Tripsinizar a 37 °C até as células soltarem.
  4. Neutralizar a tripsina e centrifugar.
  5. Contar e semear o novo frasco.

  Abrir protocolo completo Calcular semeadura
• Congelamento e Criopreservação em breve

  Como estocar linhagens em nitrogênio líquido com DMSO.

  Cultivo Celular
  O que vai ter

  DMSO como crioprotetor Resfriamento lento (~1 °C/min) Identificação dos criotubos Transferência para N₂ líquido
• Descongelamento de Células em breve

  Recuperação de células a partir de estoque congelado.

  Cultivo Celular
  O que vai ter

  Descongelamento rápido a 37 °C Remoção do DMSO Primeira troca de meio
• Coloração de Gram em breve

  Diferenciação entre bactérias Gram-positivas e Gram-negativas.

  Microbiologia
  O que vai ter

  Cristal violeta Lugol Álcool-acetona Safranina

  Enquanto isso, veja o Gram na prática em S. aureus e S. pyogenes.

• Ensaio de Fagocitose com Macrófagos em breve

  Avaliação da capacidade fagocítica frente a partículas ou patógenos.

  Imunologia
  O que vai ter

  Preparo dos macrófagos Incubação com partículas Índice fagocítico
• Contagem Celular em Câmara de Neubauer em breve

  Contagem e cálculo de viabilidade com azul de tripan.

  Geral
  O que vai ter

  Diluição com azul de tripan Leitura dos 4 quadrantes Cálculo de viabilidade

  Usar a calculadora de Neubauer